Prévention du risque chimique

Salons

2013-04-18T12:55:52Z

L'unité de Prévention du risque chimique assure une présence sur certains salons.

Salon Préventica 2013

Santé au travail – sécurité des personnes et des biens

Retrouvez-nous au salon Préventica du 28 au 30 mai 2013, sur le stand i 28 du Grand Palais, 1 boulevard des Cités-Unies, à Lille.

Le risque chimique, niveau 2

2013-04-03T05:40:00Z

Comment s'inscrire ?

Objectifs

Analyser et évaluer le risque chimique dans son environnement professionnel ;
déterminer les priorités d'actions.

Public

Ingénieurs hygiènes et sécurité, médecins du travail et autres acteurs de prévention impliqués dans l'évaluation du risque au poste.

Prérequis

Une connaissance de base des risques chimiques et des éléments principaux de maîtrise est indispensable, équivalente à celle dispensée lors du stage Risque chimique, connaissance et prévention niveau 1.

Programme

Harmonisation européenne : les apports de REACH et SGH/CLP en matière de sécurité (3 h 30) ;
atelier pratique d'identification des dangers. Utilisation des sources d'information (3 h 30) ;
atelier pratique (jeu pédagogique) incompatibilité et stockage des produits (2 h) ;
document unique et évaluation du risque chimique au poste de travail (5 h) ;
introduction au transport des matières dangereuses (1 h 45) ;
maladies professionnelles et surveillance biologique (1 h 45).

Environ 20 % du temps de formation est consacré à des ateliers d'application.

Intervenants

Ingénieurs de l'unité de prévention du risque chimique et intervenants spécialisés.

Lieu	CNRS - Délégation Ile-de-France Sud, avenue de la Terrasse, 91190 Gif-sur-Yvette.
Organisation	2,5 jours – 16 stagiaires maximum.
Coût	1000 euros.
Dates des prochains stages	du mercredi 12 au vendredi 14 juin 2013 du mercredi 4 au vendredi 6 juin 2014

Comment s'inscrire ?

Wikiradio CNRS

2012-12-11T09:49:00Z

La Wikiradio du CNRS, une webradio participative et collaborative pour dépasser les frontières !

Des émissions en direct que vous retrouvez en podcasts immédiatement. Des applications smartphones pour écouter en mobilité, le direct ou les podcasts.

Le risque chimique, niveau 1

2012-11-09T10:05:00Z

Comment s'inscrire ?

Objectifs

Se sensibiliser au risque chimique en milieu professionnel ;
comprendre la nature des dangers chimiques ;
être capable d'identifier les situations à risque ;
obtenir des conseils pratiques de prévention.

Public

Utilisateurs de produits chimiques, techniciens, ingénieurs, chercheurs travaillant dans des laboratoires, des entreprises utilisatrices de produits chimiques.

Prérequis

Aucun.

Programme

Comprendre la nature des dangers chimiques (4 h 30) :
- dangers physiques,
- dangers toxiques ;
identifier le danger : la classification et l'étiquetage, la fiche de données de sécurité (2 h 30) ;
maîtriser les techniques de prévention des risques (5 h 30) :
- principes généraux de prévention,
- bonnes pratiques de sécurité en environnement chimique : équipement de protection collective et individuelle, stockage des produits, élimination des déchets ;
connaître les conduites à tenir en cas d'accident et d'incident (0 h 30) ;
analyser les retours d'expérience (échange) (1 h). Environ 20 % du temps de formation est consacré à des exercices d'application et discussions sur des étiquetages, la fiche de données de sécurité et l'analyse d'accidents et d'incidents.

Environ 20 % du temps de formation est consacré à des exercices d'application et discussions sur des étiquetages, la fiche de données de sécurité et l'analyse d'accidents et d'incidents.

Intervenants

Ingénieurs de l'unité de prévention du risque chimique et intervenant spécialisé en risque incendie.

Lieu	CNRS - Délégation Ile-de-France Sud, avenue de la Terrasse, 91190 Gif-sur-Yvette.
Organisation	2 jours – 16 stagiaires maximum.
Coût	800 euros.
Dates des prochains stages	lundi 7 et mardi 8 octobre 2013 jeudi 3 et vendredi 4 avril 2014 jeudi 9 et vendredi 10 octobre 2014

Comment s'inscrire ?

REACH me concerne !

2012-10-28T12:56:00Z

Dans le cadre d'un appel d'offres de la DG Environnement de la Commission européenne, l'unité de prévention du risque chimique développe un site web consacré à REACH (Registration, Evaluation and Authorisation of CHemicals).

Le règlement REACH

REACH est un règlement européen concernant la fabrication, la mise sur le marché et l'utilisation de très nombreux produits chimiques. Il vise à mieux protéger la santé humaine et l'environnement par la mise en place de procédures plus efficaces, conduisant l'industrie à communiquer davantage d'informations sur les dangers, les risques et les mesures de réduction des risques des substances chimiques.

Accéder au site

Le site « REACH me concerne »

Le site s'adresse aux différents acteurs directement concernés par les évolutions qu'apporte le règlement REACH en matière de maîtrise du risque chimique :
médecins et spécialistes de l'hygiène et de la sécurité,
utilisateurs manipulant des produits chimiques lors de leurs activités professionnelles,
élèves ingénieurs, étudiants et apprentis des filières scientifiques et techniques.

Il présente les apports et les obligations de REACH pour les utilisateurs de produits chimiques et répond aux interrogations suivantes :
en quoi REACH concerne-t-il aussi les utilisateurs et pas seulement les fabricants et les importateurs ?
quelles vont être les informations disponibles et sous quelle forme ?
comment vont-elles être recueillies ?
tous les produits chimiques sont-ils couverts ?
quelles sont les modifications apportées aux outils de la prévention ?

Les objectifs du site

Expliquer le fonctionnement de REACH.
Montrer quels sont les apports et les contraintes de REACH pour les utilisateurs professionnels et les acteurs de la prévention.
Présenter les différentes sources d'informations prévues et leur accessibilité.

Un site à vocation européenne

Les différentes pages web sont disponibles en 22 langues : allemand, anglais, bulgare, danois, espagnol, estonien, finnois, français, grec, hongrois, italien, letton, lituanien, maltais, néerlandais, polonais, portugais, roumain, slovaque, slovène, suédois et tchèque.
Des tableaux et schémas récapitulatifs, en anglais et en français, sont téléchargeables sous la forme de fichiers PDF.

Liens utiles

REACH in brief (European Commission Environment Directorate General)

Why do we need REACH ? How does REACH work ? What are the benefits and costs ? What was the decision-making process ? How will REACH be implemented ? Document PDF (en anglais)

ECHA (Agence européenne des produits chimiques)

Vue d'ensemble du règlement REACH, guides d'application, outils logiciels d'aide à la gestion des données… Pages en français

La cancérogénicité selon le CIRC

2012-09-10T09:33:46Z

Le Centre International de Recherche sur le Cancer (CIRC, ou IARC en anglais) met librement à disposition un répertoire catégorisé riche d'environ 1000 agents et circonstances d'exposition évalués pour leur risque de cancérogénicité pour l'homme.

Ces documents publiés font autorité en tant que source de données sur la cancérogénicité et leur consultation est tout à fait pertinente dans toutes les démarches d'évaluation des risques des substances chimiques pour la santé humaine.

Liste des agents cancérogènes classés selon les Monographies du CIRC

La Classification des Monographies du CIRC est en constante évolution.

Consultez la version la plus à jour sur le site du CIRC.

Sur la base de cette liste des agents cancérogènes classés par le CIRC, l'unité de Prévention du risque chimique met à disposition ci-dessous un document au format tableur (xls) de 8 feuilles regroupant les agents cancérogènes par groupe et par type (agents chimiques, mélanges complexes, agents biologiques, agents physiques, alimentation, activités professionnelles, médicaments).

Les agents cancérogènes classés par les Monographies du CIRC
Cancérogènes du CIRC Liste au format tableur XLS (classement selon les Monographies du CIRC, volumes 1-105).

Procédure d'évaluation des agents

Les évaluations sont publiées sous forme de monographies et sont librement disponibles sur le site internet du CIRC, ou peuvent être commandées. Pour réaliser ces évaluations sur un agent donné, le CIRC organise des groupes de travail constitués d'experts et représentants des agences nationales et internationales de santé. Ils effectuent un examen critique des données scientifiques disponibles chez l'homme et l'animal et évaluent ainsi le danger de cancérogénicité de l'agent sur la base des données scientifiques disponibles, du mécanisme de cancérogenèse identifié et autres données pertinentes.

À l'issue de ces évaluations, l'agent est classé pour sa cancérogénicité dans l'un des groupes de la classification propre au CIRC, reflétant l'état des connaissances sur le danger cancérogène de cet agent. Les groupes sont les suivants :

Groupe	Évaluation	Nombre d'agents évalués (au 7 août 2012)
Groupe 1	Cancérogène pour l'homme	108
Groupe 2A	Probablement cancérogène pour l'homme	64
Groupe 2B	Peut-être cancérogène pour l'homme	272
Groupe 3	Inclassable quant à sa cancérogénicité pour l'homme	508
Groupe 4	Probablement pas cancérogène pour l'homme	1

La classification d'un agent est uniquement basée sur la force probante des indications de cancérogénicité apportées par les données et non sur l'importance de l'activité cancérogène de l'agent. Ainsi, préalablement à la classification de l'agent, l'ensemble des données scientifiques disponibles chez l'homme d'une part, et chez l'animal d'autre part sont évaluées et catégorisées en fonction des informations pertinentes et utilisables de ces études. Pour cela, un système de catégorisation, basé sur une terminologie normalisée des indications de cancérogénicité chez l'homme et chez l'animal a été établi par le CIRC et permet de refléter la conclusion globale de l'ensemble de ces indications.

Catégories des indications	Conclusions des données évaluées
Indications suffisantes de cancérogénicité	Relation de cause à effet établie entre l'exposition à un agent et la survenue de cancers chez l'homme. Observation d'une incidence accrue de tumeurs dans plusieurs essais chez l'animal.
Indications limitées de cancérogénicité	Association positive entre l'exposition à un agent et la survenue de cancers chez l'homme mais avec une incertitude non exclue. Les données chez l'animal sont limitées d'un point de vue quantitatif et/ou qualitatif.
Indications insuffisantes de cancérogénicité	Les données chez l'homme ou les études animales sont absentes ou ne peuvent être interprétées.
Indications d'une absence de cancérogénicité	De nombreuses données permettent de conclure qu'il n'y a pas d'association positive entre différents niveaux d'exposition à un agent et la survenue de cancer chez l'homme. Plusieurs essais indépendants ont montré que l'agent n'est pas cancérogène chez les espèces étudiées.

La classification finale de l'agent dans un des 4 groupes s'effectue alors en fonction des catégories des indications apportées par les données obtenues chez l'homme et l'animal.

Groupes	Indications de cancérogénicité chez l'homme	Et	Indications de cancérogénicité chez l'animal
1	Suffisantes chez l'homme
1	Presque suffisantes et mécanisme d'action reconnu	Et	Suffisantes
2A	Limitées	Et	Suffisantes
2A	Insuffisantes	Et	Suffisantes
2B	Limitées	Et	Insuffisantes
	Insuffisantes	Et	Suffisantes
	Insuffisantes	Et	Limitées et mécanisme d'action reconnu
3	Insuffisantes	Et	Insuffisantes ou limitées
4	Indications d'une absence de cancérogénicité chez l'homme et l'animal
4	Insuffisantes	Et	Indications d'une absence de cancérogénicité

Cette classification est généralement utilisée par les organismes de santé publique et les industriels pour la classification réglementaire des substances chimiques mises sur le marché. Ainsi, les critères de classification des agents cancérogènes décrits dans la règlementation CLP font référence à la catégorisation des indications de cancérogénicité telles que détaillées ci-dessus.

Le rôle du CIRC

Le Centre International de Recherche sur le Cancer (CIRC ou IARC pour International Agency for Research on Cancer) fait partie de l'Organisation Mondiale de la Santé (OMS). Il a pour mission de coordonner et de mener des recherches sur les causes de cancer chez l'homme. Il élabore aussi des stratégies de détection précoce des cancers et développe des mesures de prévention à destination des praticiens, des organismes nationaux de santé publique et du public.
Le centre identifie et évalue, à travers son programme Monographies, les agents environnementaux et autres circonstances d'exposition pouvant être à l'origine de cancer chez l'homme ou susceptible d'en augmenter la fréquence d'apparition. Ces évaluations ont pour but de fournir un appui scientifique aux autorités nationales compétentes pour l'évaluation du risque de cancer dans les populations et pour le choix et la mise en place des moyens de lutte efficaces. Ces agents incluent :

les substances chimiques (benzène, formaldéhyde…) et groupes de substances chimiques (arsenic et composés inorganiques de l'arsenic, composés du nickel…) ;
les mélanges complexes de diverses substances (poussières de bois, fumée de tabac...) ;
les expositions professionnelles (pressing, fumées de soudures…) ;
l'alimentation (boissons alcoolisées, mate…),
les organismes biologiques (bactéries, virus et toxines) ;
les agents physiques (radiations ionisantes, champs magnétiques…) ;
les médicaments (chimiothérapie...).

Le BET, utile mais toxique ?

2012-07-26T09:27:00Z

Le bromure d'éthidium est bien connu des personnels de laboratoire. En biologie moléculaire et cellulaire, cette substance chimique est largement utilisée mais n'en est pas moins redoutée pour son caractère toxique et potentiellement mutagène. Quels sont ses dangers et comment les identifier ? Quelles mesures de protection et de prévention doit-on mettre en place lors de sa manipulation ?

Le bromure d'éthidium (BET) est une substance chimique couramment utilisée dans les laboratoires de biologie moléculaire et cellulaire comme marqueur non radioactif des acides nucléiques. Il permet d'identifier et de visualiser des brins d'ADN ou d'ARN dans les électrophorèses et dans d'autres méthodes de séparation.

Le BET est une substance cristalline rouge sombre, non volatile, modérément soluble dans l'eau et qui produit facilement une fluorescence de couleur rose à rougeâtre lorsqu'il est exposé aux ultraviolets.

Sa structure et sa conformation lui permettant de s'insérer entre les bases des acides nucléiques, on qualifie le BET d'agent intercalant. Sa fluorescence, plus intense lorsque le BET est intercalé dans une molécule d'ADN, fait de cette substance un indicateur très sensible pour la détection des acides nucléiques. C'est pour cette raison que son usage est très répandu. Le BET est aussi connu pour être un inhibiteur de la synthèse d'ADN.

Analyse d'acide nucléique par électrophorèse et visualisation en lumière ultra-violette (UV). Les fragments d'ADN sont séparés selon leur taille et donc leur charge électrique, dans un milieu gélifié (gélose), sous l'influence d'un champ électrique (électrophorèse).
Le bromure d'éthidium s'intercale dans la double hélice d'ADN, et émet une fluorescence en UV.

CNRS Photothèque - Jérôme Chatin

Le BET est un produit très toxique et potentiellement mutagène. Le personnel de laboratoire, le plus souvent informé des dangers de cette substance, l'utilise dans des analyses de routine et est donc susceptible d'être exposé sur de longues périodes. Il est donc indispensable d'observer des procédures adaptées lors de sa manipulation et son élimination.
Recommandations de manipulation et d'élimination : le BET au laboratoire

Caractéristiques et structure chimique du bromure d'éthidium

Noms & synonymes	– Bromure d'éthidium – Bromure de 3,8-diamino-5-éthyl-6-phénylphénanthridinium – Bromure d'homidium – BET ; EtBr
Formule brute	C21H20BrN3
CAS	1239-45-8
Masse molaire	394,31 g⋅mol-1
Point de fusion	238-240 °C
Solubilité dans l'eau	50 g⋅L-1 à 20 °C

Dans les conditions normales, le BET est un produit stable, mais il peut réagir vivement au contact d'agents oxydants forts. Le BET peut s'enflammer à température élevée, sa décomposition thermique produit des substances toxiques telles des oxydes d'azote et du bromure d'hydrogène (Fiche Toxicologique, FT236, INRS).

Toxicité du BET

Le BET est, depuis l'origine et encore aujourd'hui, utilisé comme produit vétérinaire pour traiter le bétail de certaines zones africaines contre des maladies transmises par des parasites. Assez bien toléré chez les animaux traités, les effets de l'exposition sur la santé humaine ne sont que très faiblement détaillés dans la littérature. La toxicité aiguë et chronique du BET chez l'homme reste encore inconnue par manque de données disponibles. Seuls quelques tests anciens, réalisés chez des animaux de laboratoires et in vitro permettent de dessiner un profil toxicologique de cette substance.

L'absorption du bromure d'éthidium par les voies d'expositions professionnelles courantes (contact cutané, inhalation ou voie orale) n'est pas connue chez l'homme, et n'a pas fait l'objet d'études chez l'animal.

Par analogie à d'autres composés de structure voisine, le BET est considéré comme un irritant modéré pour les yeux, les muqueuses et la peau, mais aucun test n'a été effectué. Sa toxicité aiguë est assez faible par voie orale ou par contact cutané (DL50 rat par voie orale ou cutanée [1] ≈ 1500 mg/kg) mais forte par inhalation (CL50 rat par inhalation [2] = 0,118-0,134 mg/L/4h) comme le décrit un industriel dans une fiche de données de sécurité (MSDS Ethidium Bromide, Aventor, 2011).

À ce jour, il n'existe pas de donnée disponible montrant un effet toxique chronique de la substance chez l'homme ou l'animal, par les voies d'exposition courantes (orale, par inhalation ou cutanée). Si certaines sources suggèrent un effet cancérogène du bromure d'éthidium, il n'existe pas de donnée validée. Cette dernière allégation semble par ailleurs être contredite par des études montrant un effet anti-tumoral de la substance chez la souris par inhibition de la synthèse d'ADN (Nishiwaki et al., 1974 [3]).

L'effet toxique préoccupant du bromure d'éthidium est la possibilité d'induire des mutations génétiques. Du fait de sa structure poly-aromatique à caractère hydrophobe, le BET est capable de former des liaisons faibles avec les paires de bases d'acides nucléiques et de s'insérer à l'intérieur des molécules d'ADN. C'est pourquoi on le qualifie d'agent intercalant.

En agissant de la sorte, les agents intercalants peuvent modifier la structure spatiale de la molécule d'ADN et perturber ainsi la réplication, la transcription et la réparation de l'ADN par les systèmes enzymatiques cellulaires. Tous les agents intercalants sont potentiellement mutagènes et certains tests de toxicologie permettent de les identifier. En effet, de nombreux tests in vitro de mutations géniques sur bactéries (tests d'Ames) ont montré que le BET provoque des mutations chez ce type cellulaire après activation métabolique [4] (Mattern, 1976 [5]).

Test d'Ames

Essai in vitro de mutagénicité utilisant des souches mutantes de Salmonella typhimurium. Il existe plusieurs souches incapables de se développer en absence d'histidine en raison d'un défaut métabolique dans la biosynthèse de l'histidine. Les agents mutagènes peuvent induire l'augmentation de la fréquence des mutations réverses permettant aux bactéries de récupérer leur aptitude à se développer dans un milieu sans histidine.
L'essai est également conduit en présence de fraction S9. Il s'agit d'une fraction subcellulaire issue usuellement de foies de rats traités par des polychlorobiphényles afin d'induire les enzymes hépatiques de bioactivation. La fraction S9 est utilisée pour « mimer » l'activation métabolique dans les essais toxicologiques in vitro.

D'autres études in vitro et in vivo chez diverses espèces animales ont aussi montré le potentiel génotoxique du BET. Le bromure d'éthidium, comme de nombreux agents intercalants, semble provoquer des mutations dites « décalantes » correspondant à l'insertion d'un nucléotide supplémentaire au cours de la phase de réplication de l'ADN, là où la molécule s'est insérée. Ce type de mutation ponctuelle, lorsqu'elle n'est pas réparée, provoque un décalage du cadre de lecture lors de la synthèse des protéines, produisant le plus souvent, une protéine non fonctionnelle « plus courte » (apparition d'un codon « stop » prématuré) ou chimérique en fonction du site de la mutation dans le gène.

Des essais de tératogénèse ont montré que le BET, à des doses proches des doses toxiques, provoque des malformations sévères chez des embryons de grenouilles xenopes (Test FETAX) (Courchesne, 1985 [6]).

Il n'existe, à ce jour, aucune preuve que les effets toxiques du BET observés dans les essais in vivo ou in vitro peuvent se produire chez l'homme. Mais, dans l'attente d'études où la force probante des données permettra d'infirmer ou confirmer d'une absence d'effet chez l'homme, il convient de manipuler cette substance avec une extrême prudence et de respecter des procédures rigoureuses pour éviter l'exposition professionnelle.

Classification & étiquetage du BET

Le bromure d'éthidium fait partie de la liste des substances chimiques dangereuses dont la classification et l'étiquetage sont harmonisés pour la mise sur le marché européen. Cette liste est détaillée dans l'annexe VI du Règlement de la Communauté Européenne (CE) no 1272/2008 relatif à la classification, à l'étiquetage et à l'emballage des substances et des mélanges, dit règlement CLP [7]. Le bromure d'éthidium fait partie des substances dites « CMR » (Cancérogène, Mutagène et toxiques pour la Reproduction).

Sur la base des informations disponibles, la substance est classée entre autre : « Substance mutagène sur les cellules germinales de catégorie 2 » (anciennement catégorie 3 selon la directive de classification des substances dangereuses 67/548/CEE).

Cette catégorie comprend des substances préoccupantes du fait de leur potentialité à induire des mutations héréditaires (modifications permanentes de la quantité ou de la structure du matériel génétique des cellules transmises à la descendance) dans les cellules germinales des êtres humains. En l'absence de résultats positifs provenant d'études humaines et animales, seuls les résultats in vitro décrits précédemment ont permis la classification de cette substance dans cette catégorie.

Les cellules germinales sont les cellules des organes sexuels intervenants dans le processus de fécondation : ovocytes et spermatocytes. Ces cellules, à l'origine de tout être vivant, contiennent le matériel génétique qui permettra la formation du patrimoine génétique.
Les mutations survenant au niveau des cellules germinales modifient donc l'information génétique (génotype) du nouvel individu. Ceci peut potentiellement entrainer une modification de certains caractères exprimés au niveau moléculaire, cellulaire, organique, anatomique…
Certaines mutations de ce type peuvent donc engendrer l'apparition de maladies dites génétiques.

Classification et étiquetage du bromure d'éthidium solide selon le Règlement (CE) no 1272/2008

Classification	Étiquetage
− Agent mutagène sur les cellules germinales, catégorie 2 − Toxicité aiguë par inhalation, catégorie 2 − Toxicité aiguë par ingestion, catégorie 4	DANGER
Mentions de dangers
H341 Susceptible d'induire des anomalies génétiques H330 Mortel par inhalation H302 Nocif par ingestion

Classification selon la Directive 67/548/CEE

La classification selon la Directive 67/548/CEE est présentée pour mémoire car elle est désormais caduque pour les substances (voir calendrier des périodes de transition entre les deux règlementations).

Classification	Étiquetage
− Substance mutagène, catégorie 3 ; R68 − Très toxique ; R26 − Nocif ; R22
Phrases de Risque
R68 Possibilité d'effets irréversibles R26 Très toxique par inhalation R22 Nocif par ingestion
Conseils de prudence
S1/2 Conserver sous clef et hors de portée des enfants. S28 Après contact avec la peau, se laver immédiatement et abondamment. S36/37 Porter un vêtement de protection et des gants appropriés. S45 En cas d'accident ou de malaise, consulter immédiatement un médecin. S63 En cas d'accident par inhalation, transporter la victime hors de la zone contaminée et la garder au repos.

[1] DL50 : Dose Létale 50. Mesure expérimentale de la toxicité à court terme (toxicité aiguë) d'une substance. Elle représente la quantité de substance, administrée en une seule fois, qui cause la mort de 50 % d'un groupe d'animaux d'essai. La DL50 est exprimée en masse de produit chimique administré par kilogramme de poids corporel de l'animal.

[2] CL50 : Concentration Létale 50. Mesure expérimentale de la toxicité à court terme (toxicité aiguë) d'une substance. Elle représente la concentration de substance dans l'air, inhalée dans un temps donné (4 heures), qui cause la mort de 50 % d'un groupe d'animaux d'essai. La CL50 est exprimée en masse de produit chimique par volume d'air.

[3] Nishiwaki H., Miura M., Imai K., Ohno R., & al. Experimental studies on the antitumor effect of ethidium bromide and related substances. Cancer Research, 34:2699, 1974.

[4] Équivalence de la transformation métabolique des substances chimiques absorbées par l'organisme.

[5] Mattern I.E. Mutagenicity of ethidium bromide after metabolic activation in vitro. Mutation Res., 38:120, 1976.

[6] Courchesne, C.L. & Bantle, J.A. Analysis of the activity of DNA, RNA, and protein synthesis inhibitors on Xenopus embryo development. Teratogen., Carcinogen., Mutagen., 5:177, 1985.

[7] Ce règlement remplace les anciennes directives relatives à la classification, à l'étiquetage et à l'emballage des substances et mélanges dangereux 67/548/CEE et 1999/45/CE.

Le BET au laboratoire

2012-07-25T09:27:00Z

Bien que le bromure d'éthidium (BET) soit un outil efficace, ses propriétés dangereuses exigent des procédures adaptées lors de sa manipulation et son élimination. Les conseils suivants ne sont donnés qu'à titre de recommandations. La prévention du risque chimique lié à la manipulation du BET doit suivre les règles générales relatives aux agents chimiques dangereux décrites dans le Code du Travail [1].

La classification du BET en tant qu'agent mutagène sur les cellules germinales de catégorie 2, selon la réglementation CLP, n'impose pas les obligations réglementaires particulières aux agents chimique dangereux CMR de catégorie 1A et 1B [2]. Cependant certaines structures, institutions ou laboratoires ne font pas de distinction entre les différentes catégories de substances CMR, et cette démarche mérite d'être encouragée [3].

Photo : dépôt d'échantillons d'ADN de plantes sur un gel d'agarose permettant leur analyse.
CNRS Photothèque/IBMP, Benoît Rajau.

Caractéristiques, toxicité et classification du bromure d'éthidium : le BET, utile mais toxique ?

Recommandations

Privilégier l'achat et l'emploi de bromure d'éthidium sous forme de solutions aqueuses afin de limiter l'exposition aux poussières pouvant se disperser dans l'environnement de travail. Dans le cas contraire, la manipulation du solide (pesée, mise en solution…) devra s'effectuer en système clos ou sous ventilation (sorbonne, poste de pesée sécurisé) avec un masque à poussières si besoin.
Éviter tout contact du produit pur ou en solution avec la peau et les yeux. Utiliser des équipements de protection individuelle adaptés : blouse, gants de caoutchouc nitrile, lunettes de sécurité.
Respecter les règles d'hygiène dans les locaux.
Respecter les règles de sécurité vis-à-vis de l'utilisation des lumières ultraviolettes. Privilégier la lecture des gels d'ADN en système clos par caméra.
Stocker le bromure d'éthidium dans une zone ventilée à l'abri de la lumière, de la chaleur et de l'humidité. Il devra être stocké loin des substances oxydantes. Baliser la zone en indiquant la présence d'un agent mutagène. Seules les personnes autorisées devront avoir accès au stockage. Tenir à jour un registre.
Ne pas rejeter à l'égout ou dans le milieu naturel les eaux et les déchets (y compris lingettes, gants, eaux de lavages et résidus). Utiliser les techniques d'élimination et de décontamination décrites ci-après.
Décontaminer tout matériel qui aurait été en contact avec le BET et ses solutions aqueuses et devant subir un entretien ou une réparation (ex : transluminateur, bac d'électrophorèse, pipette…).
Former toute personne manipulant du bromure d'éthidium aux risques présents et aux moyens de prévention et protection existants.
Renseigner le plus fidèlement possible les fiches d'exposition.

Les substituants du BET
Des substances alternatives au bromure d'éthidium sont disponibles sur le marché. Certaines présentent l'avantage de détecter l'ADN ou l'ARN à des concentrations plus faibles ou de se révéler sans l'utilisation d'UV. Certains de ces colorants sont présentés comme « moins toxique, non cancérogène, non ou moins mutagène » par rapport au BET.
Aujourd'hui, aucune certitude n'existe sur l'absence de risque liée à la manipulation de ces substituants. En effet, ce sont tous des agents pouvant se lier aux molécules d'ADN et peuvent donc potentiellement perturber son utilisation normale par les systèmes cellulaires. En absence de preuves avérées de leur innocuité pour la santé humaine, les mesures de prévention et de précaution doivent donc être identiques à celles mise en place pour le BET.

Techniques d'élimination et de nettoyage des surfaces souillées

Cette rubrique vise à informer sur les techniques existantes quant à l'élimination des déchets liquides contenant du BET et le nettoyage des surfaces suite à un déversement accidentel.

Oxydation par l'hypochlorite de sodium

L'hypochlorite de sodium, ou eau de Javel, est un agent de décontamination biologique couramment utilisé au laboratoire pour désinfecter surfaces et matériels mais aussi souvent utilisé à tort pour nettoyer des surfaces souillées par des agents chimiques. La méthode de décontamination du BET par l'hypochlorite de sodium est présentée par Armour [4]. Cette très controversée méthode n'est pas conseillée. L'hypochlorite de sodium est un agent qui, par oxydation, peut transformer des substances chimiques en substances réactives et donc toxiques. Quillardet et Hofnung [5] ont montré que les produits de dégradation du BET par l'hypochlorite de sodium possèdent, eux aussi, des propriétés mutagènes.

Dégradation par le permanganate de potassium en solution acide

Selon Quillardet et Hofnung, le permanganate de potassium (0,5 M) en solution d'acide chlorhydrique (2,5 M) oxyde le BET. Cette méthode est aussi controversée car les produits de réaction présenteraient eux aussi une activité mutagène (Lunn et Sansone [6]). En effet, comme l'hypochlorite de sodium, le permanganate de potassium est un agent oxydant.

Dégradation par action du nitrite de sodium et de l'acide hypophosphorique

De nombreux laboratoires préconisent cette technique de décontamination pour le traitement de surface ou de matériels souillés. Cette technique, décrite par Lunn et Sansone, utilise une solution aqueuse de nitrite de sodium et d'acide hypophosphorique. Elle conduit au remplacement partiel des amines primaires de la molécule de BET par l'oxygène. La méthode est aussi efficace pour traiter les solutions aqueuses contenant du BET : plus de 99,87 % de BET peut être éliminés. De plus, d'après les auteurs, les produits de réaction ne seraient pas mutagènes même si la méthode implique aussi l'utilisation d'un agent oxydant.

Cette méthode est adaptée aux surfaces et matériels pouvant être au contact de solutions corrosives (verre, acier inoxydable, formica, céramique, dalles de sols, filtres de transluminateurs…). Les substances et le mélange final sont corrosifs et toxiques, il convient donc de les manipuler en utilisant des équipements de protection collective (préparation sous hotte) et individuelle (blouse, gants nitrile, lunettes de protection) adéquats. En cas de nettoyage d'appareils électriques (table UV par exemple), ils devront être mis hors tension avant toute manipulation.

Préparer extemporanément une solution de décontamination contenant :
4,2 g de nitrite de sodium (CAS no 7632-00-0),
20 mL d'acide hypophosphorique à 50 % (CAS no 6303-21-5),
dans 300 mL d'eau.
Le pH du mélange doit être autour de 1,8.
Éponger les équipements et les surfaces contaminés avec une bande de papier absorbant imbibée de solution de décontamination.
Laver 5 fois de suite avec une bande de papier absorbant imbibée d'eau.
Les bandes utilisées sont placées dans un collecteur pour déchets chimiques dangereux, de même que les gants souillés. Dans le cas de la décontamination de matériels réutilisables, ils peuvent être immergés dans le mélange de décontamination au moins une heure sous hotte. La solution peut être ensuite amenée à pH compris entre 5 et 9 avec du bicarbonate de sodium avant de rincer le matériel 5 fois à l'eau. Le reste de solution est éliminé en déchets liquides dangereux.

L'efficacité de la décontamination peut être contrôlée en utilisant une lampe UV ou en mesurant la fluorescence des eaux de lavage, la procédure peut être répétée si besoin.

Cette méthode peut aussi être utilisée pour neutraliser des solutions aqueuses de BET. Dans ce cas, pour 100 mL de solution aqueuse contenant au maximum 0,5 mg/mL de BET, on ajoute 20 mL d'une solution d'acide phosphorique à 5 % et 12 mL d'une solution de nitrite de sodium à 0,5 M. Les solutions sont aussi préparées extemporanément. Après agitation brève, le mélange est laissé au repos sous hotte au moins 20 h. L'acidité du mélange est neutralisée avec du bicarbonate de sodium si besoin, avant élimination en déchets liquides dangereux. Dans le cas de matériels ne résistant pas aux solutions corrosives, un nettoyage à l'eau distillée peut être fait en remplacement de la solution de décontamination et suivi de 5 rinçages à l'eau.

Décontamination par absorption

Pour la décontamination de surface poreuse et des liquides, la résine absorbante polymérique non ionique Amberlite XAD-16 peut être utilisée, 1 g de résine absorbe environ 3,5 mg de BET. Il s'agit d'une résine commerciale disponible chez de nombreux fournisseurs de produits chimiques. La résine est hydratée de manière à former une pâte puis appliquée environ 1 h sur la surface à décontaminer. La surface est ensuite essuyée avec du papier absorbant. L'efficacité de la décontamination peut être contrôlée par dosage du BET dans les effluents. Enfin, tous les déchets solides sont éliminés en déchets chimiques dangereux. Cette résine ensachée est aussi efficace pour les solutions aqueuses contenant jusqu'à 500 µg/mL de BET.

Absorption des effluents contaminés sur charbon actif

Entonnoir et filtre charbon : Kit de filtration sur charbon (Schleicher and Schuell, VWR) gradué. Filtration de la solution au travers du filtre charbon. Élimination du filtrat à l'évier et du filtre en déchet solide dangereux.
Infusette : sachet réutilisable d'élimination de 10 mg de bromure d'ethidium (QBiogene, MP Biomedicals). L'infusette est placé dans la solution de BET plusieurs heures. Élimination du filtrat à l'évier et de l'infusette en déchet solide dangereux.
Colonne d'adsorption (Supelco (Amberchrom), Calbiochem…). Ces colonnes sont saturée à 300 mg et nécessitent un débit minimum de 200 mL/h.

Conduites à tenir en cas d'exposition au BET

En cas de projection dans l'œil :

laver aussitôt abondement à l'eau courante (rince-œil ou lave-yeux) en écartant bien les paupières et en prenant soin de ne pas contaminer l'autre œil ;
ne pas essayer d'enlever les lentilles de contact ;
consulter un ophtalmologiste.

En cas de projection sur la peau :

laver aussitôt à l'eau courante pendant 10 minutes sans frotter.

En cas de de blessures ou piqures avec du matériel souillé au BET :

laver aussitôt à l'eau courante pendant 15 minutes sans frotter ;
désinfecter avec de l'alcool éthylique 70 % (ne pas utiliser de Dakin®) ;
ne pas tenter de contrôler l'efficacité de la décontamination de la peau en s'exposant aux UV.

Dans tous les cas :

consulter en cabinet médical, aux urgences ou le service médical du lieu de travail ;
avertir l'assistant de prévention, le correspondant sécurité ou toute personne compétente ;
consigner l'accident/l'incident dans le registre d'hygiène et sécurité.

[1] Code du Travail ; articles R4412-1 à R4412-93.

[2] Dans le cas d'agents CMR de catégorie 1A ou 1B (ex 1 et 2), le remplacement par un agent non dangereux ou moins dangereux est une obligation lorsque cela est techniquement possible. « Seul un argumentaire technique fondé est recevable pour justifier de la non-substitution d'un agent CMR » (Circulaire DRT no 12 du 24 mai 2006).

[3] La classification des agents CMR repose sur une notion d'incertitude et non sur la sévérité des dommages.

[4] Armour M.A., Laboratory methods for disposal of toxic inorganic and organic chemicals, Hazardous waste control in research and education, Korenga T. et al., Ed. Lewis Publisher, 1994.

[5] Quillardet P. et Hofnung M., Ethidium bromide and safety - readers suggest alternative solutions. Trends Genet., 4:89, 1988.

[6] Lunn G. et Sansone E.B., Destruction of hazardous chemicals in the laboratory. 2nd Ed. Wiley-Interscience publication, 1994

Eau de piscine

2012-05-25T12:26:00Z

Les piscines privées familiales ont fait l'objet depuis ces dernières années d'un renforcement des mesures de sécurité obligatoires (barrières de protection, alarme, couverture de sécurité…). Ces dispositions ne doivent cependant pas faire perdre de vue un autre danger lié aux propriétés chimiques des produits utilisés pour la désinfection des eaux de baignade.

En général, les piscines privées fonctionnent en circuit fermé. Pour maintenir la qualité de l'eau et pour respecter les normes de salubrité, il est donc nécessaire d'ajouter des désinfectants qui vont contrôler les nombreux phénomènes biologiques et chimiques qui s'y produisent : apparition de moisissures et prolifération de bactéries apportées par les baigneurs.

Pour maintenir cet équilibre, il existe dans le commerce toute une variété de produits chimiques désinfectants et assainissants à base de chlore, brome ou oxygène actif. Il est conseillé de manipuler ces produits avec prudence car ils sont souvent incompatibles entre eux, c'est-à-dire qu'ils peuvent conduire à des réactions dangereuses.

Les produits les plus couramment utilisés pour l'entretien des piscines sont les agents de chloration qui libèrent du « chlore » lorsqu'ils sont dissous dans l'eau. Plusieurs formes sont commercialisées :
acide trichloroisocyanurique, dichloroisocyanurate de sodium sous forme de galets ou de granulés ;
hypochlorite de calcium sous forme de galets ;
hypochlorite de sodium (eau de javel) sous forme liquide.

Ces agents de chloration « organiques » et « inorganiques » ont des propriétés chimiques similaires et pourtant ils doivent être maintenus éloignés les uns des autres. Leur mise en contact, en présence d'humidité, peut être à l'origine d'accidents domestiques tels qu'incendie ou explosion. Il est donc important d'informer les utilisateurs des propriétés physico-chimiques de ces agents pour une meilleure sécurité lors de leur manipulation et de leur stockage.

Prévention

Ces produits doivent être conservés dans leur emballage d'origine, hermétiquement fermé. En cas de reconditionnement, le récipient utilisé doit être propre et compatible avec le produit à conserver, parfaitement étiqueté pour éviter tous accidents/incidents.

Ces produits doivent être entreposés dans des locaux frais, secs et non ensoleillés, hors de portée des enfants et des animaux domestiques et à l'écart de tout produit susceptible de réagir avec eux.

Les consignes de prévention à mettre en œuvre avec ces produits sont :

préparer les solutions en versant les produits dans une grande quantité d'eau ;
ne jamais prélever directement dans le flacon ni y replacer ce qui est en excès pour éviter les contaminations. Il faut utiliser une tasse à mesure propre, en métal ou en plastique pour chaque produit chimique à prélever ;
ne jamais réutiliser les flacons vides, il est préférable de les rincer puis de les jeter ;
limiter les quantités stockées et le temps de stockage pour éviter une humidification lente des produits.

Incendie

En cas de départ de feu, les bidons exposés doivent être éloignés. L'emploi du CO2 ou d'eau en grande quantité sont des moyens efficaces d'extinction, alors que les poudres à base de sels ammoniacaux ainsi que les agents halogénés doivent être évités. Les personnes habilitées à éteindre le feu doivent être équipées d'appareils de protection respiratoire autonomes et isolants du fait de la toxicité des produits de décomposition qui se dégagent.

Déversement de produits solides

En cas de déversement, les produits doivent être récupérés dans un récipient propre, correctement étiqueté et éliminés en déchets spéciaux du fait de leurs propriétés dangereuses. La personne intervenant doit être équipée de gants en matériaux nitrile, butyle ou fluoro-caoutchouc et doit récupérer les produits à l'aide d'une pelle propre. Aucun contact avec la peau ne doit avoir lieu.

Les produits chimiques utilisés pour la désinfection des eaux de piscine sont des produits qui possèdent une réactivité chimique qu'il faut connaître et ne pas négliger car elle peut être source d'incidents voire d'accidents. Ménage, jardinage, bricolage… sont d'autres activités qui nécessitent aussi l'emploi de divers produits chimiques. Avant toute manipulation de produit, il est important de lire les étiquettes, les documents d'information fournis lors de l'achat du produit ou de demander conseil auprès des fournisseurs.

Contrôle de la qualité de l'eau

Avant toute intervention sur l'équilibre de l'eau, il est conseillé de contrôler le pH (ou potentiel hydrogène) et le chlore grâce à un kit d'analyse.

Quelques consignes permettent d'utiliser ces kits d'analyse en toute sécurité :
L'analyse doit être effectuée par un adulte.
Il convient d'éviter le contact des réactifs avec la peau.
Les échantillons d'eau analysées ne doivent pas être rejetés dans la piscine. Le kit doit être rincé à l'eau courante.
Se laver les mains après utilisation du kit.
Le matériel composant le kit d'analyse doit être stocké dans un endroit adapté hors de portée des enfants.
Il existe d'autres dispositifs permettant l'analyse des eaux de piscine : bandelettes réactives, testeur de pH…

Photo : kit d'analyse pH et Chlore par colorimétrie à l'ortho-toluidine (Chlore) et au rouge de phénol (pH) pour piscine privée. Au centre, les réactifs sont ajoutés aux échantillons d'eau. La teinte produite est à comparer au nuancier associé.
Photo A.-C. Macherey, PRC-CNRS

En savoir plus :

Les dangers des produits désinfectants
Propriétés chimiques des agents de chloration, précautions à prendre lors de leur manipulation et de leur stockage. Lire la suite

Du bon usage de l'hypochlorite de sodium (eau de javel)
Propriétés chimiques de l'eau de javel, dangers et prévention dans son usage professionnel et domestique. Lire la suite

Bibliographie

Circulaire DGS/SD 7 A/DRT/CT 4 no 2003-47 du 30 janvier 2003 relative aux risques d'incendie ou d'explosion lors du stockage et/ou de l'utilisation de produits de traitement des eaux de piscines.
GESTIS – database on hazardous substances BGIA (Institute for occupational safety and health / Berufgenossenschaftliches Institut für Arbeitssicherheit) – Allemagne.

Photo : Kakiski (morguefile.com)

Préventica Lille

2012-04-10T14:08:00Z

Santé au travail – sécurité des entreprises (congrès & salon) 28, 29, 30 mai 2013 – Grand Palais – 1, Boulevard des Cités-Unies – Lille - À noter